Характеристика Neisseria gonorrhoeae

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) - это бактерии округлой, бобовидной формы, размерами 1,25-1,0x0,7-0,8 мкм. Они почти неподвижны, не образуют споры. Хорошо окрашиваются красителями.

При окраске по Граму имеют красновато-розовый цвет (см. рисунок 1, белыми стрелками отмечены нейссерии). При окраске метиленовым синим - голубовато-синий цвет; бриллиантовой зеленью - зеленоватый цвет.

gonorrhea

Рисунок 1 - Гонококки в мазке, окрашенном по Граму. Источник иллюстрации - Dr. Dovinova P.

Бактерии имеют своеобразное строение:

  1. 1Их клеточная стенка устроена сложно, имеет многослойную структуру (6 слоев) и большое количество антигенов. В составе ее имеются липополисахарид (ЛПС, LOS), фосфолипиды и белки.
  2. 2Бактерии имеют фимбрии, которые позволяют гонококкам прикрепляться к клеткам эпителия после попадания в организм хозяина. Эти фимбрии меньше и тоньше, чем жгутики, состоят из белков. На основании типов и факта наличия фимбрий нейссерии делятся на 4 группы: T1, T2, T3, T4.
  3. 3Они могут менять свою форму в зависимости от воздействия условий окружающей среды (например, антибактериальной терапии): палочкообразную, L-форму и др.

Для жизнедеятельности эти микроорганизмам необходим кислород. Гонококки неустойчивы во внешней среде, погибают при высыхании, под воздействием антисептиков, яркого света и УФ-облучения. Этим и обусловлена относительная редкость бытового инфицирования.

Именно поэтому мазок, взятый у пациента из уретры или половых путей для окрашивания и микроскопии, должен быть доставлен в лабораторию как можно скорее.

Культуральные свойства

Neisseria gonorrhoeae достаточно капризны, растут только на специализированных жидких и твердых питательных средах с добавлением белков плазмы крови:

  1. 1Оптимальные условия для выращивания культуры - 37 градусов Цельсия, кислотность среды 7,2-7,6. То есть оптимальная температура среды для выращивания культуры примерно равна температуре тела человека.
  2. 2Используемые среды для культивирования: ГНК-агар (Оболенск), гонококковая среда – СВГ (институт Пастера), аргинин-агар (Микроген), среда Левенталя, зарубежные - Oxoid, Gibco, BRL, MacConkey, шоколадный агар, обогащенный углекислым газом и др.
  3. 3На твердой питательной среде образуют мелкие беловатые, серо-беловатые или бесцветные прозрачные округлые колонии (капли росы). Размер колоний 0,5-2,0 мм.
  4. 4В жидкой питательной среде образуют пленку, которая оседает на дно.
  5. 5Гонококки могут расщеплять глюкозу с образованием кислоты, другие сахара расщеплять не могут; не расщепляют белки, не вызывают гемолиз, не образуют аммиак, сероводород, индол. Пробы на оксидазу всегда положительные.
ГНК-агар (Оболенск)

Рисунок 2 - ГНК-агар (Оболенск). Для просмотра кликните по иллюстрации

Антигенные свойства и иммунитет

Антигенная структура этих нейссерий сложна и крайне вариабельна:

  1. 1Пили.
  2. 2Белки наружной мембраны.
  3. 3Липополисахарид (ЛПС).

Врожденный иммунитет отсутствует. Приобретенный иммунитет слабый, человек может повторно заражаться гонореей после ранее перенесенного заболевания. Повторное инфицирование возможно благодаря высокой изменчивости бактерий, они способны значительно менять свои антигенные свойства под влиянием защитных сил организма и медицинских препаратов.

Хронизация инфекции может обусловлена следующими факторами:

  1. 1Изменчивость антигенной структуры;
  2. 2Механизмы ухода от факторов защиты макроорганизма;
  3. 3Устойчивость к антибактериальным препаратам.

Патогенность гонококков обусловлена их антигенами, ферментативной активностью и некоторыми другими факторами. Рассмотрим подробнее.

  1. 1IgA1-протеазы, способные расщеплять IgA.
  2. 2ЛПС (LOS), выполняющий функцию эндотоксина. Провоцирует развитие бурной воспалительной реакции в ответ на внедрение инфекционного агента. Кроме того, в штаммах, которые вызывают системную инфекцию, LOS связывает сиаловую кислоту из сыворотки, образуя микрокапсулу сиалилированного LOS, которая позволяет бактериям противостоять иммунитету макроорганизма.
  3. 3Пили, обеспечивающие адгезию и заражение клеток эпителия мочеполовых органов. После непосредственного прикрепления к эпителиоцитам бактерии вступают во вторую стадию - связывания, опосредованную белком наружной мембраны P.II (также известным, как Opa).
  4. 4Белок наружной мембраны P.II (Opa) необходим для тесного связывания и проникновения бактерий в эпителиальную клетку. Эти же белки связываются с LOS соседней бактерии, в результате чего на поверхности эпителия образуются биопленки.
  5. 5Наружный мембранный порин  P.I (Por) ингибирует способность фагоцитов убивать захваченные бактерии.
  6. 6Пориновые каналы (porA, porB) в наружной мембране играют ключевую роль в вирулентности. Гонококковые штаммы с porA могут обладать собственной устойчивостью к специфическим антителам и повышенной способностью проникать в эпителиальные клетки.
  7. 7Гонококки способны образовывать на внешней мембране два рецептора трансферрина (Tbp1 и Tbp2) и один рецептор лактоферрина (Lbp), которые стимулируются в условиях с низким содержанием железа и способны непосредственно экстрагировать железо из трансферрина и лактоферрина. Эти белки могут также выделять железо из гема и гемоглобина.
  8. 8Некоторые приобретенные плазмиды и генетические мутации усиливают вирулентность патогенов. Бета-лактамаза типа ПЭМ-1 (пенициллиназа) влияет на связывание пенициллина  и обусловливает устойчивость гонококков к пенициллину.
  9. 9TetM защищает рибосомы и придает устойчивость к тетрациклину. Изменения в генах gyrA и parC приводят к устойчивости к фторхинолонам и снижению проницаемости клеток для антибактериальных препаратов.

Пути передачи инфекции

Основной путь передачи инфекции среди взрослого населения - половой. Незащищенные генитальные, анальные и оральные контакты способствуют попаданию инфекционных агентов на слизистую оболочку мочеполовой системы, прямой кишки и ротоглотки.

Риск передачи N. gonorrhoeae от инфицированной женщины в уретру ее партнера-мужчины составляет приблизительно 20% на один эпизод вагинального полового акта, риск инфицирования повышается до 60-80% после 4 или более сексуальных контактов.

Напротив, риск передачи инфекции от мужчины к женщине при однократном половом акте составляет примерно 50-70%, при этом имеется мало свидетельств повышения степени риска инфицирования при многократных контактах.

У детей возможно заражение при:

  1. 1Половых контактах, в том числе и принудительных;
  2. 2При прохождении ребенка по родовым путям матери;
  3. 3При использовании общих предметов личной гигиены вместе со взрослыми (полотенца, мочалки, совместное купание в ванной, подмывание ребенка инфицированными родителями).

Бытовой путь передачи заболевания встречается нечасто, при обращении врач сначала исключит половой путь  инфицирования (осмотр у гинеколога делают даже маленьким девочкам, если у последних обнаружена инфекция).

Таким образом, к факторам риска патологии можно отнести:

  1. 1Лиц, практикующих незащищенные сексуальные контакты (традиционные и нетрадиционные);
  2. 2Лиц, имеющих несколько половых партнеров;
  3. 3Лиц с низким социально-экономическим статусом;
  4. 4Лиц, перенесших ранее ЗППП;
  5. 5Лиц, злоупотребляющих наркотическими веществами, работников секс-индустрии;
  6. 6Лиц, рано начавших половую жизнь;
  7. 7Детей и других членов семьи инфицированного.

После попадания на эпителий мочеполовой системы бактерии уже через 24-48 часов попадают в межклеточное пространство. В среднем, инкубационный период гонореи у мужчин и женщин (гонококкового уретрита и вульвовагинита) составляет 1-14 дней, он значительно укорачивается при микст-инфекциях (например, сочетание с урогенитальным хламидиозом и трихомониазом), сопутствующей патологии мочеполовой системы.

Удлинение инкубационного периода возможно при применении антисептиков, спринцеваний, вагинальных свечей, приеме антибактериальных препаратов. Всегда следует помнить о возможности бессимптомного носительства!

Эпидемиология

  1. 1По оценкам, ежегодно в Соединенных Штатах регистрируется 700 000 новых случаев инфекции, при этом пациенты сообщают о менее, чем половине случаев. В 2009 году о 301 174 случаях заболевания сообщили в Центры США по контролю и профилактике заболеваний (CDC). В среднем по США в 2009 году было зарегистрировано 99,1 случая на 100 000 населения, что на 10,5% меньше, чем в 2008 году. Некоторые эксперты оценивают ежегодную стоимость лечения гонореи и ее осложнений в 1,1 миллиарда долларов.
  2. 2В общемировой практике примерно 200 миллионов новых случаев гонореи регистрируются ежегодно. В 1999 году число новых случаев, диагностированных в Северной Америке, составило 1,56 млн. чел.; в Западной Европе - 1,11 млн. чел.; в Южной и Юго-Восточной Азии - 27,2 млн. чел.; в Латинской Америке и Карибском бассейне - 7,27 млн. чел.
  3. 3Гонорея была наиболее распространенной ЗППП во всем мире, по крайней мере, в течение большей части XX века, хотя с середины 1970-х годов инициативы общественного здравоохранения в промышленно развитых странах привели к снижению заболеваемости.
  4. 4Отношение инфицированных мужчин к женщинам составляет примерно 1:1,2. Однако, женщины могут быть бессимптомными носителями, в то время как мужчины являются ими редко.
  5. 5Женщины моложе 25 лет подвергаются наибольшему риску заражения. Мужчины, имеющие половые контакты с мужчинами, гораздо чаще приобретают, переносят гонорею и имеют значительно более высокие показатели устойчивости к антибиотикам.
  6. 6Серьезные осложнения гораздо чаще встречаются у женщин.

Какие заболевания вызывает Neisseria gonorrhoeae?

В зависимости от локализации инфекции Neisseria gonorrhoeae может стать причиной следующих заболеваний:

  1. 1Гонококковый уретрит и цистит (уретрит чаще у мужчин, цистит у женщин).
  2. 2Острый и хронический вульвовагинит, цервицит, эндометрит, сальпингоофорит, бартолинит у женщин.
  3. 3Баланопостит у мужчин (редкая форма).
  4. 4Специфический простатит, орхит, эпидидимит у мужчин.
  5. 5Конъюнктивит (бленнорея) у новорожденных, специфическое поражение сосудистой оболочки глаза.
  6. 6Специфические артриты, бурситы, синовиты и теносиновиты.
  7. 7Проктит и парапроктит (инфицирование при анальных контактах).
  8. 8Фарингит и тонзиллит (инфицирование при оральных контактах).
  9. 9Осложнения и генерализация инфекции: абсцедирование, пельпиоперитонит, перитонит, менингит, менингоэнцефалит, эндокардит, пневмония, сепсис (гонококкемия) и др.

По течению инфекция может быть:

  1. 1Острой;
  2. 2Хронической;
  3. 3Бессимптомное носительство. Именно эта группа пациентов наиболее опасна в эпидемиологическом плане.

Лабораторные методы диагностики

Для установления факта инфицирования используются несколько видов лабораторной диагностики:

  1. 1Простая бактериоскопия (другие названия - микроскопическое исследование мазка из уретры и половых путей, мазок на микрофлору и GN, мазок на гонорею и др.).
  2. 2Бактериологическое исследование (посев материала на питательную среду и определение чувствительности полученной культуры к антибактериальным препаратам).
  3. 3ПЦР-диагностика (PCR), ДНК-зонд (ДНК-гибридизация).
  4. 4Лигазная цепная реакция (LCR, ЛЦР).
  5. 5Амплификация РНК (NASBA).
  6. 6Серологические тесты. Эти тесты включают реакцию латексной агглютинации, ELISA, иммунопреципитацию и РСК. Из-за их более низкой чувствительности и специфичности, особенно в популяциях с низкой распространенностью заболевания, эти анализы обычно не используются для диагностики гонореи, но они могут использоваться в качестве дополнения к другим лабораторным тестам.

В качестве материала для исследования могут выступать:

  1. 1Мазки из уретры, заднего свода влагалища и цервикального канала.
  2. 2Отделяемое из прямой кишки.
  3. 3Соскобы и мазки-отпечатки с конъюнктивы глаза.
  4. 4Кровь и спинномозговая жидкость при осложненной генерализованной инфекции.
  5. 5Пунктат из суставной полости (при специфических артритах).

Микроскопия мазков и соскобов

Это простой, рутинный и высокоинформативный метод диагностики гонореи, особенно связанной с поражением мочеполовой системы (острые уретриты, вульвовагиниты, цервициты). Информативность и чувствительность простой микроскопии варьирует от 80 до 100%. Наиболее низкая чувствительность наблюдается при использовании данного метода в диагностике гонококкового фарингита, проктита.

Суть данного метода сводится к обнаружению гонококков Нейссера в препарате, изготовленном путем нанесения мазка (соскоба) на предметное стекло, с последующим высушиванием и окрашиванием (метиленовым синим или по Граму). При обнаружении нейссерий результат записывается как положительный, при их отсутствии в препарате - отрицательный.

Как правильно берется мазок на гонорею у женщин, читайте здесь (перейдите по внутренней ссылке). Перед сдачей мазка из уретры мужчинам необходимо соблюсти следующие правила:

  1. 1Не мочиться за 2 часа до взятия материала, чтобы струя мочи не смыла имеющиеся в уретре выделения.
  2. 2Проконтролировать, чтобы Вам не назначались никакие антибактериальные препараты в течение последних 3-4 недель.
  3. 3Проконтролировать, чтобы Вами не использовались никакие местные антисептики в течение последних 10 дней.
  4. 4В течение 2 суток до забора материала отказаться от половых контактов (любых).

На рисунке ниже в препарате, полученном при окрашивании по Граму мазка из уретры, можно видеть нейссерий.

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) в мазке из уретры у мужчин

Рисунок 3 - Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) в мазке из уретры у мужчин. Источник иллюстрации - Gonorrhea. Janet M. Torpy, MD; Cassio Lynm, MA; Robert M. Golub, MD.

Культуральный метод диагностики

Культуральный метод диагностики (другие названия - бактериологическое исследование, посев на питательную среду и т. д.) используется реже, чем простая микроскопия. Это обусловлено длительностью выращивания культуры из полученного от пациента материала.

Чувствительность культурального метода при симптоматическим уретрите у мужчин оценивается 95-100%, чувствительность того же метода при эндоцервикальной локализации инфекции - 80-90%.

Когда используется данный метод?

  1. 1Потребность оценить чувствительность гонококков к антибактериальным препаратам (хроническая инфекция, генерализация инфекции).
  2. 2Отсутствие эффекта от проводимой медикаментозной терапии.
  3. 3Редкая локализация инфекции.

Основные питательные среды, используемые для получения культуры мы рассмотрели выше. Результат может быть отрицательным (нет роста культуры) и положительным (есть рост). Как выглядит культура нейссерий, можно увидеть на рисунке 2.

Молекулярно-биологические методы

В полученном от пациента материале можно обнаружить ДНК нейссерий. Методы, позволяющие это сделать, полимеразно-цепная реакция (ПЦР), ДНК-гибридизация, лигазная цепная реакция.

Аналогичный метод, позволяющий обнаружить РНК патогенов в исследуемом субстрате, называется амплификацией РНК (NASBA). Оба этих метода лабораторной диагностики относятся к высокоточным и высокочувствительным.

Результат этих проб может быть положительным (обнаружены РНК и ДНК) и отрицательным (в материале нет РНК и ДНК возбудителя). Не имеет смысла подсчитывать количество гонококков Нейссера в субстрате, так как любой положительный результат требует медикаментозной терапии.

Данные методы могут быть применимы к любому материалу для исследования (мазок из уретры, влагалища и цервикального канала, соскоб, пунктат, кровь и так далее), могут назначаться при любой локализации возбудителя.

Гонококки и их чувствительность к антибактериальным препаратам

Гонококки Нейссера чувствительны ко многим группам антибиотиков:

  1. 1Цефалоспорины (цефтриаксон, цефиксим);
  2. 2Макролиды (азитромицин);
  3. 3Тетрациклины (доксициклин);
  4. 4Аминоциклитолы (спектиномицин);
  5. 5Фторхинолоны.

Согласно клиническим рекомендациям РФ, CDC  и ВОЗ для лечения гонореи наиболее эффективными являются следующие препараты из вышеописанных групп:

  1. 1Цефтриаксон (Торговые названия - Роцефин, Лендацин, Аразан, Цефсон и др.);
  2. 2Цефиксим (Торговые названия - Панцеф, Супракс и др.);
  3. 3Азитромицин (Торговые названия - Сумамед, Азитрокс, Хемомицин, Зитролид и др.);
  4. 4Доксициклин (Юнидокс Солютаб);
  5. 5Спектиномицин (Кирин).

Режимы дозирования и схемы лечения зависят от возраста пациента, сопутствующих заболеваний, формы и степени тяжести инфекции, поэтому здесь их рассматривать не будем. Подробнее с ними можно ознакомиться в соответствующих разделах.

С конца 1940-х годов наблюдается рост антибиотикорезистентных штаммов. Наибольшую обеспокоенность представляет высокий процент случаев, обусловленных нейссериями, продуцирующими пенициллиназу.

Устойчивость к фторхинолонам быстро увеличивается в течение последнего десятилетия на большинстве континентов и в Соединенных Штатах. CDC сообщила о резистентности к фторхинолонам в 6,8% изолятов 2004 года, 9,4% изолятов 2005 года и 13,3% изолятов 2006 года (Medscape).

Динамика чувствительности гонококков на территории РФ непрерывно изучается и нашими учеными. Последние несколько лет отмечается значительное снижение их чувствительности к азитромицину, ампициллину, доксициклину, тетрациклину, ципрофлоксацину, эритромицину, цефуроксиму [3-4, 8].

Пока еще сохраняется эффективность цефриаксона, цефиксима, спектиномицина, поэтому эти препараты могут быть использованы для лечения гонореи у взрослых и детей. Эти препараты и фигурируют в большинстве клинических рекомендаций.

Профилактика заражения

Профилактика гонореи проводится на общественном и индивидуальном уровнях. Общественные меры профилактики должны включать:

  1. 1Диспансеризация и регулярные профосмотры среди населения, особенно среди декретированных групп; донесение до пациентов информации о ЗППП, методах их диагностики и индивидуальной профилактики.
  2. 2Донесение до пациентов о невозможности и недопустимости самолечения.
  3. 3Оценка распространенности гонореи среди мужчин и женщин, контроль за уровнем общественной профилактики.
  4. 4Санитарно-просветительская работа в школах, ВУЗах и других учебных учреждениях. Пик заболеваемости разными ЗППП приходится на молодой возраст (примерно до 30-35 лет), когда постоянные связи еще не оформлены.
  5. 5Вакцинация пациентов из групп риска для снижения процента лиц с хронической бессимптомной и малосимптомной инфекцией.

Индивидуальная профилактика включает:

  1. 1Регулярное (как минимум раз в год) обследование у гинеколога (у женщин) и уролога (или дерматовенеролога, для мужчин) с исследованием мазков на гонорею и другие ЗППП.
  2. 2Хранение верности своему половому партнеру, исключение беспорядочных связей.
  3. 3Применение барьерной контрацепции. Только мужские презервативы позволяют предотвратить нежелательную беременность и инфицирование бактериальными и вирусными половыми инфекциями.
  4. 4Своевременное обращение за медицинской помощью при возникновении специфических симптомов.