Микробные сообщества играют фундаментальную роль в обеспечении гомеостаза во влагалище и в предотвращении колонизации патогенными бактериями, но механизмы, с помощью которых они это осуществляют, до конца не определены.

Исторически, для исследования влагалищного биоценоза применяются такие методы, которые воспроизводят лишь частичную картину среды.

Развитие новейших методов диагностики, основанных на анализе последовательностей гена 16S рРНК, в сочетании с созданием высокопроизводительных технологий секвестрирования "нового поколения", теперь позволяет создание полноценной классификации значимых бактерий.

Это позволяет значительно расширить наше понимание экосистемы влагалища и сложных взаимодействий между организмом человека и микробными факторами внутри него.

С момента их первого описания в 1892 году Густавом Додерляйном, лактобациллы считаются доминирующими обитателями влагалища.

Господствующая гипотеза считает, что вагинальные лактобациллы способствуют созданию защитной среды во влагалище за счет снижения рН в результате выработки молочной кислоты и благодаря конкуренции за питательные вещества и жизненное пространство с другими (патогенными) микроорганизмами.

Лактобациллы также производят другие метаболиты, бактериоцины (особые вещества, убивающие другие бактерии) и перекись водорода (Н2О2), что может способствовать торможению роста других микроорганизмов, и поэтому имеют потенциал, чтобы активно защищать экосистему влагалища от чужеродных микроорганизмов.

В ходе недавних исследований были получены значительные успехи в понимании состава влагалищных микробных сообществ.

Эти исследования показали наличие нескольких различных типов микробных сообществ в различных расовых и этнических группах. Подобное наблюдение очень важно, поскольку различия в микробном составе могут кардинально влиять на развитие инфекций или дисбаланса.

1. Лактобактерии в составе влагалищной микрофлоры

У здоровых женщин во влагалище преобладают лактобактерии. Существует более 130 видов лактобактерий, обитающих в различных средах и имеющих общую способность  ̶  вырабатывать молочную кислоту. 20 видов из них могут обитать во влагалище.

В отличие от большинства других участков тела, здоровая микрофлора влагалища включает в себя только один или два вида, наиболее распространенными из которых являются Lactobacillus iners, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus jensenii и Lactobacillus gasseri.

Механизмов подавления колонизации влагалища другими бактериями у лактобактерий несколько:

  • Влагалищные эпителиальные клетки вырабатывают гликоген, который лактобактерии используют для производства молочной кислоты.

Некоторые виды лактобактерий в искусственных условиях продуцируют перекись водорода; в то же время, последние исследования показывают, что в гипоксических условиях, которые существуют во влагалище, концентрации молочной кислоты могут не достичь уровней, являющихся ингибирующими для других бактерий.

Таким образом, рост бактерий, обуславливающих развитие бактериального вагиноза, может быть подавлен молочной кислотой, но не перекисью водорода.

  • Некоторые виды лактобактерий также вырабатывают бактериоцины, которые могут непосредственно убивать другие виды бактерий.
  • Лактобактерии, вероятно, также могут конкурировать с другими организмами за питательные вещества и рецепторы на эпителиальных клетках.

Эти механизмы отличаются между разными видами лактобацилл. Сравнительный геномный анализ L. crispatus и L. gasseri, L. iners и L. jensenii предоставил доказательства того, что каждый вид лактобактерий обладает своим уникальным набором белков, что может влиять на механизмы адаптации.

Будущие исследования, направленные на характеристику функциональной роли этих белков и генов, смогут дать важную информацию об их влиянии на здоровье женщин.

  • Лактобактерии могут также подавлять рост возбудителей инфекционных процессов за счёт конкуренции за рецепторы клетки-хозяина, используемые урогенитальными патогенами, такими как гарднерелла влагалищная, гонококки, кандида альбиканс, золотистый стафилококк, стрептококк группы B, синегнойная палочка, стрептококк агалактие, кишечная палочка и превотелла бивиа.

Таким образом, лактобактерии с более высоким сродством к рецепторам клеток хозяина могут вытеснить патогенные виды.

  • Кроме того, предполагается возможность связывания некоторыми лактобактериями самих патогенов, например, с гарднереллой вагиналис, кандидой альбиканс и эшерихией коли, тем самым препятствуя их связыванию с клетками хозяина.

Гликоген во влагалище и постоянное слущивание эпителиальных клеток, к которым прикрепляются бактерии, способствуют реализации механизмов врожденного иммунитета против колонизации патогенами.

2. Другие микроорганизмы влагалища

Несмотря на преобладание во влагалище лактобацилл, являющихся наиболее распространенными видами нормальной микрофлоры, у значительного количества практически здоровых женщин отсутствует необходимое число лактобацилл, но зато имеются факультативные или строго анаэробные бактерии, что обычно связано со слегка повышенным уровнем рН.

Это, как правило, микроорганизмы следующих родов: Atopobium, Corynebacterium, Anaerococcus, Peptoniphilus, Prevotella, Mobiluncus, Gardnerella и Sneathia.

Некоторые из этих бактерий, например, бактерии рода Atopobium, также могут производить молочную кислоту. Таким образом, открытым остаётся вопрос, могут ли бактерии быть только «хорошими» или только «плохими».

3. Факторы, влияющие на нормальную флору

Многие факторы влияют на стабильность микробиоты влагалища. Состав влагалищной микрофлоры может колебаться в зависимости от возраста, полового созревания, менструаций, беременности, инфекций, контрацепции и сексуального поведения.

  • Воздействие спермицидов, β-лактамаз или других антибиотиков может уменьшить количество лактобацилл и, как следствие, увеличить восприимчивость к влагалищным инфекциям.
  • Обсеменение влагалища происходит вскоре после или во время родов. Внутриутробно плод, как думали раньше, существует в стерильной или почти стерильной среде, но некоторые исследования показали наличие малого количества микроорганизмов в плаценте.

При родах через естественные родовые пути новорожденный подвергается воздействию разнообразных микробов. Последние исследования показывают, что новорожденные обсеменяются микроорганизмами из влагалища и прямой кишки их матерей.

  • Изменения в составе влагалищной флоры могут быть обусловлены гормональными сдвигами, которые происходят на протяжении всей жизни женщины.

В раннем детстве рН во влагалище нейтральная или слабо щелочная. Когда уровень эстрогена во время полового созревания нарастает, гликогена становится больше, это приводит к преобладанию бактерий, продуцирующих молочную кислоту.

Эти бактерии обладают способностью ферментировать гликоген в глюкозу и, в итоге, образовывать молочную кислоту. В результате этого снижается уровень pH, что создаёт неблагоприятную среду для многих болезнетворных, “не очень хороших” бактерий.

Традиционно высокий уровень молочнокислых бактерий считается визитной карточкой здорового влагалища, и у большинства женщин репродуктивного возраста во влагалище преобладают именно лактобактерии.

Когда у женщины наступает период менопаузы, уровень эстрогенов и гликогена уменьшается и, как следствие, снижается количество лактобактерий во влагалище. В результате всё меньше образуется молочной кислоты, а уровень рН возрастает.

Заместительная гормональная терапия во время и после менопаузы нейтрализует этот эффект и способствует значительному снижению уровня рН влагалища по сравнению с женщинами в постменопаузе.

  • Состав микрофлоры влагалища существенно отличается среди женщин репродуктивного возраста различных этнических групп.
  • Также динамическое равновесие влагалищной микрофлоры может быть изменено под влиянием факторов окружающей среды и внешних факторов (например, приём антибиотиков, гигиена влагалища, половые контакты, гормональная терапия и т. д.). Эти изменения могут привести к микробному дисбалансу или дисбиозу в мочеполовых путях.

В обзоре исследований, опубликованных между 1966 и 2003 годами, бактериальный вагиноз был диагностирован на основании клинической картины в 22 ̶ 50 % случаев, кандидозный вульвовагинит в 17 ̶ 39 %, трихомониаз в 4 ̶ 35 % случаев. Примерно в 30 % случаев на основании жалоб поставить диагноз не представляется возможным.

Отсутствие зуда делает диагноз кандидозного вульвовагинита маловероятным. Отсутствие специфического, неприятного, "рыбного" запаха влагалищных выделений делает неправдоподобным бактериального вагиноза.

Наличие признаков воспаления и отсутствие неприятного запаха чаще ассоциируется с кандидозным вульвовагинитом.

Для подтверждения/исключения диагноза "бактериальный вагиноз" и "вагинит", визуальной оценки нарушений микрофлоры во влагалище используют микроскопию мазков на флору (иначе - мазок на степень чистоты, мазок на GN, микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора)).

При микроскопии могут наблюдаться 4 основных картины, которые раньше называли "степени чистоты влагалища". Сейчас используют другую терминологию и классификацию, но суть исследования остается прежней.

4. Степени чистоты влагалища

Выделяют следующие основные степени чистоты влагалища:

  1. 1Нормоценоз;
  2. 2Нормоценоз (носительство);
  3. 3Бактериальный вагиноз (дисбиоз);
  4. 4Вагинит.

При нормоценозе (1 степень чистоты) при микроскопии видны клетки плоского эпителия, совсем нет лейкоцитов, много лактобактерий (палочек Додерлейна), реакция во влагалище кислая (рН 3,8 ̶ 4,2). На рисунке 1 можно видеть, как именно выглядит мазок на флору при 1 степени чистоты влагалища (нормоценозе).

Иллюстрация 1

Рисунок 1 - Нормоценоз влагалища здоровой женщины. Визуализируются клетки плоского эпителия и небольшое количество грамположительных палочек

При 2 степени чистоты (промежуточный тип мазка) лактобактерий уже можно видеть мало, плоского эпителия много, встречаются единичные лейкоциты (до 10 в поле зрения), реакция кислая (рН 4,0 ̶ 4,5). В поле зрения микроскопа можно видеть грамположительные и грамотрицательные палочки, грамположительные кокки.

Картинка 2

Рисунок 2 - Компенсированный бактериальный вагиноз. Клетки плоского эпителия, микрофлоры не обнаружено

При 3 степени чистоты лактобактерий мало, доминирует другая кокковая и палочковая флора, возможно обнаружение мицелиев грибов, реакция слабощелочная (рН 5,0 ̶ 5,5). Количество лейкоцитов может быть в пределах нормы или больше нормы (10-40).

На рисунке 2 выше можно видеть картину, которую видит лаборант при компенсированном баквагинозе.

Часто визуализируются "ключевые клетки". Это особые эпителиальные клетки, в значительной степени покрытые бактериями при микроскопии, что придаёт им характерный зернистый вид.

Такая микроскопическая картина характерна для бактериального вагиноза (на рисунке 3 - декомпенсированный баквагиноз).

Иллюстрация 3

Рисунок 3 - Декомпенсированный бактериальный вагиноз. В мазке определяется большое количество грамотрицательных коккобацилл, ключевые клетки

При 4 степени чистоты влагалища - лактобацилл нет совсем, визуализируется разнообразная бактериальная флора, возможны единичные трихомонады, гонококки, множество лейкоцитов, реакция щелочная (рН 6,0 ̶ 6,5).

Изображение 4

Рисунок 4 - Микроскопическая картина неспецифического вагинита (лейкоциты, большое количество грамположительных и грамотрицательных палочек, увеличение числа клеток эпителия)

На сегодняшний день считается, что термин «чистота влагалища» не является корректным, так как не полностью отражает возможное состояние флоры влагалища, поэтому результаты микроскопического исследования рассматриваются и оцениваются с позиций новой классификации.

Нормальным считается мазок, который соответствует описанным выше первым двум степеням чистоты влагалища.

Бессимптомное носительство - при выявлении условно-патогенных микроорганизмов в концентрациях, превышающих физиологические, но фоне единичных лейкоцитов и снижении числа эпителиальных клеток (рН 4,0 ̶ 4,5).

5. Бактериальный вагиноз

Бактериальный вагиноз  ̶  это нарушение баланса влагалищной микрофлоры при единичных лейкоцитах и эпителиальных клетках (рН более 4,5).

Бактериальный вагиноз представляет собой заболевание полимикробной этиологии, которое регистрируется у 25 - 50% женщин, посещающих гинекологические клиники.

Исследования выявили, что бактериальный вагиноз увеличивает риск передачи ВИЧ и других передаваемых половым путем заболеваний.

Факторами риска его развития является смена полового партнера, спринцевания, курение и небезопасные сексуальные практики.

Рецидивирующий бактериальный вагиноз является серьезной проблемой для многих женщин, имеет частоту рецидивов более, чем у 50 % пациенток в течение 12 месяцев после лечения.

Для бактериального вагиноза, как правило, характерны нарушения нормальной экосистемы влагалища, отмечается уменьшение количества лактобактерий, а также увеличение количества различных грамотрицательных и/ или анаэробных бактерий.

Значительное увеличение влагалищных анаэробов при бактериальном вагинозе связано с повышенной выработкой протеолитических ферментов и последующим разрушением влагалищных пептидов до аминов.

В щелочной среде амины становятся зловонными, становятся причиной типичных выделений из влагалища и провоцируют выброс провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-1β и ИЛ-8.

Женщины с бактериальным вагинозом, как правило, жалуются на выделения из влагалища с неприятным «рыбным» запахом. Вместе с тем, у многих женщин с бактериальным вагинозом нет никаких проявлений и жалоб.

Роль G. vaginalis в этиологии бактериального вагиноза не может считаться доказанной на данном этапе развития гинекологии. Как лечить бактериальный вагиноз с 3 степенью чистоты гинекологического мазка, можно читать в нашей статье, посвященной этой проблеме.

6. Вагинит

Микроскопическая картина неспецифического  и специфического вагинита соответствует 3 – 4 степеням чистоты влагалища. Врачи традиционно диагностируют вагинит на основании симптомов, данных обследования пациентки, рН вагинальной жидкости, микроскопии мазка на флору и теста на запах.

В сочетании эти тесты имеют чувствительность и специфичность 84 и 85 процентов для кандидозного вульвовагинита; 85 и 100 процентов для трихомониаза, если сравнивать со стандартным методом ПЦР.

Бактериальный вагиноз и вагинит свидетельствуют о патологическом процессе и требуют качественного дообследования. При вагините важно исключить ИППП (хламидиоз, трихомониаз, урогенитальный микоплазмоз и др.)

Для максимально точной оценки состояния микрофлоры применяются количественные методы.

Это бакпосев с последующим уточнением чувствительности к антибиотикам, а также количественная ПЦР-диагностика, позволяющая максимально точно посчитать количество аэробов/анаэробов (Фемофлор).

Качественная ПЦР поможет выявить возбудителей, которые являются однозначно "плохими" (трихомонады, трепонемы, гонококки, хламидии). Как лечить неспецифический вагинит с 4 степенью мазка на степень чистоты, можно читать в соответствующей статье.

Влияние микробиома на человека во многих отношениях остаётся недооцененным. Мы не знаем пока, как нормальная микрофлора влияет на развитие и рост человека, его иммунитет, обмен веществ и даже поведение.

Но уже сейчас очевидно, что микробный дисбиоз может привести к болезни, угрожать здоровью и жизни человека.